เนื้อหา
นักจุลชีววิทยาศึกษาลักษณะของจุลินทรีย์เช่นสาหร่ายแบคทีเรียโปรโตซัวเชื้อราและไวรัสโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ แม้ว่าสิ่งมีชีวิตบางชนิดเช่นโปรโตซัวและเซลล์ยีสต์จะมองเห็นได้ง่ายผ่านสไลด์ แต่เซลล์แบคทีเรียก็ต้องการการย้อมสี นักวิทยาศาสตร์ได้พัฒนาวิธีการต่างๆเช่นเทคนิคการย้อมสีแกรมการย้อมสีที่ทนกรดและการย้อมสีเรืองแสงเพื่อปรับปรุงการแสดงภาพของเซลล์แบคทีเรียและโครงสร้างของเซลล์ ด้วยวิธีการย้อมสีดังกล่าวทำให้สามารถระบุลักษณะโครงสร้างที่ช่วยในการจำแนกแบคทีเรียได้
การรับชมที่ดีขึ้น
สิ่งมีชีวิตของแบคทีเรียมีขนาดเล็กมากจนส่วนใหญ่มองเห็นได้เฉพาะภายใต้กล้องจุลทรรศน์ที่มีกำลังขยาย 1,000 เท่า อย่างไรก็ตามการเพิ่มขนาดอย่างง่ายไม่ได้ให้ระดับความชัดเจนเพียงพอดังนั้นจึงต้องมีการย้อมสีแบคทีเรียก่อนการสังเกตเพื่อให้ความชัดเจนที่จำเป็นสำหรับการมองเห็น
การระบุและการจำแนกประเภท
การย้อมสีแบคทีเรียเพื่อแยกแยะระหว่างประเภทของแบคทีเรียเรียกว่าการย้อมสีที่แตกต่างกัน แกรมสเตนเป็นคราบที่แตกต่างซึ่งแยกแยะแบคทีเรียขึ้นอยู่กับเนื้อหาของผนังเซลล์ ด้วยวิธีนี้เซลล์แบคทีเรียจะทำปฏิกิริยากับสีย้อมคริสตัลไวโอเลตเพื่อเปลี่ยนเป็นสีม่วง ด้วยการเพิ่มสารฟอกสีเซลล์แบคทีเรียบางชนิดจะสูญเสียสีในขณะที่บางชนิดไม่ทำ ด้วยการเติมสีย้อม safranin เซลล์ที่เปลี่ยนสีจะกลายเป็นสีแดงในขณะที่เซลล์แบคทีเรียที่ไม่สูญเสียสีจะยังคงเป็นสีม่วง เซลล์ที่เปลี่ยนเป็นสีแดงเรียกว่าสิ่งมีชีวิตแกรมลบและเซลล์ที่ไม่เปลี่ยนเป็นสีแดงจัดเป็นสิ่งมีชีวิตแกรมบวก เทคนิคการย้อมสีแกรมเป็นวิธีการที่รวดเร็วในการระบุแบคทีเรียที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อในเบื้องต้น ในทำนองเดียวกันกระบวนการย้อมสีที่ทนกรดช่วยในการระบุสิ่งมีชีวิตที่อยู่ในกลุ่มแบคทีเรียที่เรียกว่า mycobacteria เช่น Mycobacterium tuberculosis
การตรวจจับความเป็นไปได้
ในตัวอย่างของการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียการตรวจหาเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่เป็นสิ่งสำคัญ วิธีการต่างๆเช่นการย้อมสีเรืองแสงช่วยในการระบุว่าเซลล์เพาะเลี้ยงสามารถทำงานได้หรือไม่ แบคทีเรียที่มีชีวิตมีความสามารถในการเปลี่ยน tetrazolium 5-cyano-2,3-ditolyl chloride (CTC) ให้เป็นสีย้อมที่แสดงการเรืองแสงสีแดง ดังนั้นเมื่อวัฒนธรรมที่มีสี CTC ปล่อยสารเรืองแสงเหล่านี้แสดงว่ามีแบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ Propidium iodide เป็นคราบที่ทำหน้าที่เฉพาะกับเซลล์ที่ไม่มีชีวิตซึ่งมีเยื่อหุ้มที่เสียหายดังนั้นจึงมีประโยชน์ในการระบุเซลล์แบคทีเรียที่ตายแล้ว
การระบุโครงสร้างเซลล์
การย้อมสีเป็นวิธีการสร้างภาพที่ชัดเจนของโครงสร้างเซลล์ต่างๆ ตัวอย่างเช่นวิธีการย้อมสี Feulgen ช่วยให้สามารถระบุนิวเคลียสภายในเซลล์แบคทีเรียได้ในขณะที่การย้อมสีอัลเบิร์ตมีประโยชน์ในการมองเห็นเม็ดสีเมตาโครมาติก ในทำนองเดียวกันเทคนิคการทำให้ชุ่มด้วยเงินช่วยให้สามารถระบุ spirochetes ได้ แฟลกเจลลาสังเกตได้ง่ายเมื่อถูกระบายสีด้วยสีของริว การย้อมสีเขียวมาลาไคท์ช่วยในการระบุสปอร์ของแบคทีเรีย
