เนื้อหา
แอลกอฮอล์เย็นถูกใช้เพื่อแยก DNA ออกจากสารละลายที่มีน้ำเป็นส่วนประกอบเพื่อให้บริสุทธิ์สำหรับการทดสอบทางพันธุกรรมที่ตามมา การเติมแอลกอฮอล์ลงในสารละลายที่มี DNA เป็นวิธีที่ง่ายในการทำให้บริสุทธิ์ที่อุณหภูมิต่ำกว่าและชะลอเอนไซม์ที่ย่อยสลายซึ่งจะทำให้ผลการสกัดดีขึ้น
DNA ตกตะกอนต่อหน้าแอลกอฮอล์ (ภาพดีเอ็นเอโดย Allyson Ricketts จาก Fotolia.com)
ทำลายกำแพงเซลล์
ขั้นตอนการสกัดเพื่อให้ได้ DNA บริสุทธิ์นั้นจะต้องกำจัดส่วนประกอบของโมเลกุลและสารเคมีทั้งหมดของเนื้อเยื่อที่ DNA ถูกดึงออกมา ขั้นตอนแรกเกี่ยวข้องกับการทำลายผนังเซลล์ สามารถทำได้กับสารเคมีต่าง ๆ ที่กัดกร่อนไปยังเยื่อหุ้มเซลล์ แต่ไม่ทำลาย DNA เซลล์อาจถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันทำให้เป็นเนื้อเดียวกันหรือถูกบดเพื่อทำลายเยื่อหุ้มเซลล์
ผนังเซลล์จะต้องถูกทำลายเพื่อเข้าถึง DNA ที่อยู่ภายใน (เซลล์ 72 ภาพโดย chrisharvey จาก Fotolia.com)ขจัดไขมัน
เมื่อผนังเซลล์ถูกทำลายผงซักฟอกจะถูกเพิ่มเข้าไปเพื่อกำจัดไขมันและน้ำมันที่ทำหน้าที่เป็นเยื่อหุ้มเซลล์ ผงซักฟอกทำให้เกิดการละลายของน้ำมันและไขมันในสารละลาย
กำจัดโปรตีน
โปรตีนและเอนไซม์สามารถย่อยสลายได้โดยการเติมโปรตีเอสในสารละลาย โปรตีเอสสลายโปรตีนเป็นเปปไทด์ขนาดเล็กและกรดอะมิโน
DNA ที่ตกตะกอน
การเติมแอลกอฮอล์น้ำแข็งเย็นลงในสารละลายจะทำให้เกิดการตกตะกอนและรวมดีเอ็นเอ สารพันธุกรรมสามารถรวบรวมได้โดยการปั่นแยกตัวอย่างและแยกชั้นของเหลว มันควรจะอยู่เป็นตะกอนเล็ก ๆ ที่ด้านล่างของหลอด centrifuge
การทำให้บริสุทธิ์ DNA
DNA สามารถล้างได้โดยแขวนลอยใหม่ในสารละลายแอลกอฮอล์เย็นและปั่นแยกอีกครั้งหลายครั้งเพื่อให้ได้ตัวอย่างที่บริสุทธิ์มาก แอลกอฮอล์ทั่วไปที่ใช้ ได้แก่ เอทานอลและไอโซโพรพานอล กระบวนการนี้ทำให้ตัวอย่างบริสุทธิ์มากในการทดสอบอย่างเข้มงวด